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Durante a pandemia global, além do desenvolvimento da Covid-19, o desenvolvimento da vacina é outro foco de aten??o das pessoas. Institui??es científicas em todo o mundo est?o acelerando o desenvolvimento de vacinas para conter o coronavírus, que ainda se espalha. Sabe-se que mais de 180 países e regi?es se comprometeram a aderir ao “Plano de Implementa??o de Vacinas do Novo Coronavírus”, cobrindo 90% da popula??o mundial. Atualmente, quatro tipos de vacinas COVID-19 receberam autoriza??o de uso de emergência em vários países e regi?es, uma das quais é a vacina de vetor de adenovírus recombinante.

Vetor de adenovírus

Processo de produ??o e solu??o de vacina de adenovírus coronavírus recombinante

A produ??o de uma vacina de vetor de adenovírus recombinante segue vários processos, desde a cultura celular, inocula??o do vírus, amplifica??o e coleta de fluido viral, até o isolamento, purifica??o e prepara??o da vacina. O processo de produ??o é mostrado na imagem abaixo.

De acordo com o processo de produ??o acima, TRUKING fornece uma solu??o completa cobrindo quatro processos, ou seja, processo de cultura upstream, processo de separa??o e purifica??o downstream, processo de prepara??o de mídia e processo de prepara??o de buffer.

Processo de Cultura Upstream

A linha celular HEK 293 é usada para a produ??o de vacina recombinante. A principal vantagem dessa linhagem celular é que ela cresce em suspens?o em cultura de células, um processo simples que pode ser ampliado diretamente.

O processo de amplifica??o celular aumenta de estágio a estágio de 50L, 200L a 1000L. O biorreator série BR da TRUKING com design de mistura razoável tem bom controle de oxigênio dissolvido e CO2, minimizando o impacto do corte físico no crescimento celular (incluindo velocidade) e realizando efeito de cultura ideal e título de replica??o de vírus.

Um dos problemas na otimiza??o da produ??o de adenovírus é o efeito da densidade celular. Para a vacina de vetor de adenovírus recombinante, o título do vírus está intimamente relacionado à viabilidade celular, e a quantidade de antígeno da vacina está obviamente relacionada à densidade celular. O biorreator da série BR TRUKING tem um maior rendimento durante a cultura de células HEK293, pois otimiza as condi??es de infec??o, as condi??es de cultura e o tempo de colheita. A densidade celular após a otimiza??o é de até 1 × 107 células / ml, 1012 VP, IU: VP <100, e a produ??o de vírus de um único HEK293 é de 5000 IU / célula.

Separa??o downstream de alta eficiência e tecnologia de purifica??o

A solu??o de vírus colhida por meio de cultura a montante precisa ser purificada para atender a três requisitos: a) a pureza da vacina é mais de 90% sem polímeros; b) o conteúdo de DNA e proteína devem atender aos requisitos da farmacopéia; c) a solu??o original pode ser preservada de forma estável sem agrega??o e degrada??o. Em princípio, o melhor processo de purifica??o pode atingir um alto rendimento abrangente com poucas etapas de purifica??o.

O processo de purifica??o a jusante da vacina recombinante inclui lise, clarifica??o, ultrafiltra??o e concentra??o, cromatografia em duas etapas, ultrafiltra??o e filtra??o de esteriliza??o.

TRUKING fornece uma solu??o completa para isolamento e purifica??o, incluindo sistema de filtra??o profunda, sistema de autocromatografia, coluna de autocromatografia, esta??o de carregamento automático, sistema de homogenato, sistema de ultrafiltra??o e sistema de filtra??o antibacteriana.

O sistema de cromatografia TRUKING (AutoPrep) possui as seguintes características: a) software de controle estável e amigável, desenvolvido na mesma plataforma do sistema de ultrafiltra??o; b) os componentes s?o modularizados e o caminho do fluxo é propositalmente projetado para que os líquidos fluam da posi??o inferior para a posi??o superior para facilitar a elimina??o de bolhas, e a área morta no sistema de tubula??o de 10L é inferior a 100ml; c) tubula??es n?o soldadas eliminam riscos de ferrugem e risco de vazamento, e feedback de válvula e outros projetos de seguran?a est?o em vigor; d) a eficiência da coluna foi validada para ser melhor do que a dos principais fornecedores internacionais.

Teste de fita VB12

Teste Coluna

Sistema de preparo multiestágio

De acordo com a configura??o da oficina e programa??o de produ??o, TRUKING pode calcular o volume, tipo e tempo de meio de cultura necessário para cultura upstream e amplifica??o, e o volume e tipo de solu??o tamp?o necessária para purifica??o downstream.

A TRUKING pode projetar e fazer o layout do sistema de prepara??o do meio de acordo com o cálculo do material do processo de produ??o, o cronograma de produ??o e o layout real da fábrica.

Conclus?o

Como o adenovírus é uma tecnologia de plataforma que pode atingir alta express?o com qualidade controlável, ele suporta P&D e prepara??o rápida de vacinas e vários medicamentos de terapia genética. A solu??o total da TRUKING desenvolvida para vacina de vetor de adenovírus recombinante e terapia gênica de vetor de adenovírus oferece forte garantia para a produ??o de vacinas Covid-19 e drogas de terapia genética.